PICOQUANT  激光器 MicroTime 200 STED

PICOQUANT  激光器 MicroTime 200 STED

微时代 200 STED

具有超分辨率能力的时间分辨共聚焦荧光显微镜

基于倒置显微镜体的完整共聚焦STED系统

光学分辨率低于 50 nm

在 640 nm 处激发，并可选择使用 595 nm 和 660 nm 处的附加激光器激发

多达 6 个真正并行的检测通道，使用 SPAD 或混合 PMT

支持门控 STED （gSTED） 和 gSTED-FCS

用于 2D 和 3D（终身）成像和精确点定位的压电扫描

高级易用的数据采集和分析软件 SymPhoTime 64

同步原子力显微镜/集采仪/STED测量的升级选项

支持适用于MicroTime 200的所有其他方法，即FLIM，FCS，FCCS，FLCS，FRET等。

FLIMbee振镜附件，具有出色的扫描速度灵活性和出色的空间精度

使用FLIMbee振镜扫描器通过x行扫描提供FCS扫描

近年来，超分辨率显微镜越来越受到关注。它现在已经超越了发展阶段，并允许研究以前被光的衍射极限所掩盖的生物系统。超分辨率成像最流行的技术之一是受激辐射耗尽（STED）显微镜。STED通常使用共聚焦显微镜进行，因此非常适合添加到MicroTime 200中。STED与系统的集成已朝着最高的鲁棒性和易用性迈进。该系统允许在不进行冗长的对准准备的情况下进行STED显微镜检查，同时仍然可以选择修改系统并使用开放式显微镜平台MicroTime 200的全部功能。

小于 50 nm 的光学分辨率

MicorTime 200 STED - 用于 EASYDOnut 相位板的安装STED显微镜使用受激发射耗尽原理。在激光聚焦中激发荧光团后，使用具有较长波长的激光的第二个甜甜圈形焦点通过受激发射主动去激发外围的分子。在MicroTime 200 STED中，甜甜圈是使用所谓的EASYDOnut相板创建的。它入光束路径并将STED激光聚焦改变为甜甜圈形状，同时使激发激光器不受影响。这种简单的实现使得从同一光纤产生的两束激光束的空间对准变得不必要，并且产生的空间分辨率小于50 nm。由于MicroTime 200 STED的时间分辨数据采集原理，还可以对所有测量数据应用时间门。这种门控 STED（或 gSTED）方法可提高图像分辨率并减少食品接触物质的观察量。

激发波长的选择

MicroTime 200 STED 的激光组合单元 （LCU）MicroTime 200 STED的激励系统围绕一个专用的激光组合单元构建，该单元集成了用于STED的激励激光器和STED激光器本身。标准激发波长为640 nm，可以选择与595 nm和660 nm的附加激光器结合使用，以进行双物种STED成像。由于 STED 激光器在 765 nm 处的高功率，因此在操作仪器时特别注意确保用户的安全。第二个激光器组合单元与额外的脉冲二极管激光器也可以连接到系统，用于非STED应用，如FLIM，FRET或FCS。

多通道激光驱动器PDL 828“Sepia II”可以灵活地调节激光功率和重复频率，它甚至允许并行寻址多个激光器，从而实现脉冲交错激励（PIE）等先进技术。激励脉冲和 STED 脉冲之间的时间延迟是可调的，以实现最高的灵活性和最佳的 STED 分辨率。

扫描技术

FLIMbee振镜中光束路径的草图MicroTime 200平台的多功能性与FLIMbee振镜扫描器相辅相成，可提供从非常慢到快速的扫描速度，同时保持高精度。这种高度灵活的速度允许从磷光寿命成像（PLIM）到使用rapidFLIM的快速荧光寿命测量的各种应用。此外，凭借其高精度和高灵敏度，FLIMbee扫描仪非常适合通过STED进行超分辨率显微镜检查，从而实现低至单分子水平的成像。

配备FLIMbee扫描仪的MicroTime 200是单分子检测（SMD）方法的不错选择，例如spFRET，PIE-FRET，（STED-）FCS，FLCS，FLCCS，双焦点FCS（2fFCS），甚至是各向异性测量。此外，双光子激发（TPE）具有去扫描和非去扫描检测功能。

FLIMbee振镜的核心由三个高精度振荡镜组成，具有出色的线性度、可重复性和低漂移。两个Y轴振镜确保激光束在物镜入口处保持静止。这种反射镜配置可最大限度地减少图像场的暗角，并确保在宽扫描范围内保持恒定的焦量。FLIMbee扫描仪在使用100倍物镜时提供10 nm的最小像素尺寸。

关于FLIMbee振镜的宣传册

对于需要紫外（255至400 nm）和NIR（1100至1400 nm）光谱区域光的应用，或者需要小于10 nm的像素尺寸的应用，建议使用标准压电扫描仪。

具有单光子灵敏度的检测子系统

MicroTime 200 STED 的检测单元在MicroTime 200 STED中，通过压电工作台（可选地与用于3D成像的高精度PiFoc元件结合使用）来促进扫描。压电扫描的选择确保了高重新定位精度和稳定性，这对于高质量的STED图像至关重要。该系统可配置为多达六个单独的检测通道。对于在765nm处耗尽的STED染料的深红色发射，通常使用SPAD，因为它们在该光谱范围内具有高达70%的高检测效率。

带皮秒分辨率的门控 STED

HydraHarp 400 - 多通道TCSPC模块（小型配置）使用时间相关单光子计数（TCSPC）进行数据采集，使用PicoQuant独特的时间标记时间分辨（TTTR）数据采集模式和皮秒分辨率。采集的TTTR数据不仅可以用于常规的STED成像，还可以用于进行门控STED（gSTED）测量。TTTR数据采集模式的优点是，它允许执行除STED之外截然不同的测量程序，例如FLIM，FCS，甚至重合相关（“防凸起”），仅基于一种基本数据格式。TTTR格式受PicoQuant所有可用的TCSPC电子设备的支持。

直观的数据采集和分析

SymPhoTime 64 STED 软件的屏幕截图SymPhoTime 64是MicroTime 200 STED系统软件，具有专用的STED数据采集和分析协议。例如，在测量预览中集成了预设的时间门控，并且可以在数据分析期间设置灵活的时间门，以实现更高的STED分辨率。独特的荧光图案匹配方法可用于从用相同STED激光波长记录的数据中分离多个物种。

FLIM、FRET、FCS 等

MicroTime 200 STED不僅可以用於執行STED和STED-FCS，還支持MicroTime 200可用的所有其他測量和分析程序。这包括FLIM，FCS，FCCS，FLCS，FRET，PIE-FRET或强度时间迹线，仅举几例。